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Chemifluoreszenz: Molekulares Luminol ist ein chemisch fluoreszierendes Molekül, das in Gegenwart von Wasserstoffperoxidmolekülen in Aminophthalsäure im angeregten Zustand umgewandelt werden kann, die eine starke Fluoreszenz aussendet.Wasserstoffperoxid ist das Produkt vieler biooxidativer Reaktionen, daher ist es einfach, diese biooxidativen Reaktionen durch die Einführung von Luminol mit der Photodetektion zu verknüpfen.Beispielsweise kann die Glucoseoxidase/Katalase-Sonde die Konzentration von Wasserstoffperoxid oder Glucose in der Probe erfassen, und die Reaktionszeit beträgt nur 0,5 s (dynamische Methode).Die Kombination chemilumineszierender Substanzen mit immunologischen Reaktionen und das Ausdrücken der Konzentration der nachgewiesenen Immunkomponenten durch Lichtreaktionen wird als Chemilumineszenz-Immunoassay-Technologie bezeichnet.Im Jahr 1976 schlug Shmeder einen Chemilumineszenz-Immunoassay vor, bei dem Luminol-H2O2 und sein Derivat ABEI als Anzeigesystem für die Nachweisreaktion verwendet wurden.Derzeit sind Luminol und seine Derivate die am häufigsten verwendeten Marker in Chemilumineszenz-Immunoassay-Anwendungen.Unter alkalischen Bedingungen kann, katalysiert durch Mikroperoxidase, eine große Anzahl von Photonen freigesetzt werden.Luminol kann für den WesternBlot von HRP-markierten Antikörpern und den Nukleinsäure-Hybridisierungsnachweis von HRP-markierten Sonden verwendet werden.Es wird auch in der modernen kriminalpolizeilichen Erkennung von Blutflecken eingesetzt.Eine Verbindung, die als Chemilumineszenzmarker verwendet werden kann, muss die folgenden Bedingungen erfüllen: Die Quantenausbeute der Lumineszenz ist hoch;seine physikalisch-chemischen Eigenschaften stimmen mit dem untersuchten System überein;seine Lumineszenzreaktion ist das Ergebnis der Oxidationsreaktion des Lumineszenzstoffs;Innerhalb des verwendeten Konzentrationsbereichs ist es für lebende Organismen innerlich ungiftig.Üblicherweise werden verschiedene Arten von Chemilumineszenzreagenzien verwendet: Acridinester, ein weit verbreiteter Chemilumineszenz-Tracer, eine trizyklische organische Verbindung, die leicht zu oxidieren ist und für die Oxidationsreaktion keinen Katalysator erfordert und Photonen bei 430 nm freisetzt;Luminol und Isoluminol und ihre Derivate sind die ausgereiftesten Chemilumineszenzmittel.Bereits 1964 wurde über Chemilumineszenz berichtet, Luminol, Isoluminol und ihre Derivate wurden für die Chemilumineszenz verwendet.Immunoassays haben bessere Ergebnisse erzielt.Lumineszenzdetektion: Die optimale Fluoreszenzwellenlänge beträgt 400 nm (Detektion der Chemilumineszenz in einer Lösung mit 60 mm K2S2O8, 100 mm K2CO3, pH 11,5).

Chemilumineszenz: Als empfindliche Testmethode wird Chemilumineszenz häufig zum Nachweis freier Radikale und Reaktionsmetaboliten eingesetzt, die in Enzymen, Zellen und biologischen Organismen produziert werden.Das von ihren Oxidationsprodukten und Metaboliten emittierte Licht kann mit verschiedenen Photometern genutzt werden.Erkennung.Chemilumineszenz wird aufgrund ihrer Empfindlichkeit, Schnelligkeit, einfachen Bedienung und ihres niedrigen Preises häufig beim Screening und der Erforschung von Antioxidantien wie Polyphenolen, Polysacchariden, Flavonoiden und Anthrachinonen eingesetzt.Zu den häufig verwendeten Chemilumineszenzsystemen zur Bestimmung von Superoxidanionen gehören Xanthinoxidase-Luminol, Pyrogallol-Luminol und Dimethylsulfoxid-Luminol.Ersteres ist ein enzymatisches System und die beiden letzteren sind ein nicht-enzymatisches System.Zu den Chemilumineszenzsystemen zur Bestimmung von Hydroxylradikalen gehören hauptsächlich Kupfersulfat-Hefe (oder Knochenmarkszellen)-Ascorbinsäure-Wasserstoffperoxid, CuCl-H2O2-o-Phenanthrolin-Carbonat-Puffer, Kupfersulfat-o-Phenanthrolin-Ascorbinsäure-Wasserstoff Peroxid-5-Chemilumineszenzsysteme, Eisensulfat-Luminol-Wasserstoffperoxid und Eisensulfat-Luminol, beinhalten alle die klassische Fenton-Reaktion zur Erzeugung von Hydroxylradikalen und greifen dann das Lumineszenzmittel an, um Chemilumineszenz zu erzeugen, die zur Messung der Entfernung von Extrakten verwendet werden kann Aktivität reaktiver Sauerstoffradikale.Experimentelle Methode: Verwenden Sie ein Pyrogallol-Luminol-Chemilumineszenzsystem: Luminol wird mit 0,05 mol/L NaOH-Lösung zu einer Lösung mit einer Konzentration von 0,05 mol/L verarbeitet, an einem dunklen Ort gelagert und mit doppelt destilliertem Wasser vor der Verwendung verdünnt. Auf 1 mmol/L Lösung verdünnen, 1 mmol/L verwenden. L HCl, um eine 0,01 mol/L-Lösung von Pyrogallol herzustellen, lagern Sie sie im Kühlschrank bei 4 °C und verdünnen Sie sie vor der Verwendung mit doppelt destilliertem Wasser auf das 16-fache einer 6,25×10-4 mol/L-Lösung.Vor der Verwendung wurde 0,05 mol/L pH10,2Na2CO3-NaHCO3-Puffer (enthaltend 0,1 mmol/LEDTA) zubereitet und mit 1 mmol/L Luminol im Verhältnis 2:1 (Volumenanteil) gemischt, um vor der Versuchsmischung Luminol und Carbonatpuffer zu bilden.Während der Messung injizieren Sie 10,0 μL Proben unterschiedlicher Konzentration (0, 0,08, 0,4, 2 und 10 mg/ml) in die Lumineszenzzelle (mit dem Probenpuffer als Kontrolle) und injizieren Sie dann 6,25×10-4mol/L Pyrogallol 0,05 Schließlich wurden 0,94 ml einer Mischung aus Luminol und Kohlensäurepuffer zugegeben, um die Reaktion zu starten (30 °C), die Lumineszenzintensität wurde in Intervallen von 2 s gezählt und die gesamte integrierte Lumineszenzintensität nach 300 s gemessen.Die Intensität der Hintergrundlumineszenz war die Lumineszenz ohne Zugabe von Pyrogallol.Wert.Darüber hinaus gibt es Chemilumineszenz-, Fluoreszenzspektroskopie- und NBS-Dichlorfluorescein-Chemilumineszenzsysteme zur Bestimmung der Fluoreszenz-Chemilumineszenz usw., deren größter Vorteil in der hohen Empfindlichkeit liegt.

Chemische Eigenschaften: Gelbes kristallines Pulver.Leicht löslich in Lauge, löslich in verdünnter Säure, nahezu unlöslich in Wasser und unlöslich in Alkohol.Neutrale oder leicht saure Lösungen zeigen bei Einwirkung von ultraviolettem Licht eine starke hellblaue Fluoreszenz.Schmelzpunkt 329-332℃

Verwendung: Als Reagenz und Indikator für die chemische Analyse.Verwenden Sie ein Nachweisreagenz für die Chemilumineszenzanalyse (z. B. Bestimmung von Metallkationen oder Blut).

Verwendung: Für die Chemilumineszenzanalyse, wie zum Beispiel: Metallkationen, Blut und Glukokortikoide

Verwendung: Lumineszenztest: Emmax440 nm (Chemilumineszenz; 60 mm K2S2 O8, 100 mm K2 CO3, pH 11,5; nach Zugabe von H2O2) Chemilumineszenz-Reagenz und -Indikator, häufig verwendet in der Chemilumineszenz-Analyse, wie Metallkationen, Blutimmunität usw.