Produkte

Die Brucellen sind die Erreger der Brucellose, einer weltweit verbreiteten Zoonose.Diese Bakterien sind fakultative intrazelluläre Parasiten und können daher ihren Stoffwechsel an die extra- und intrazellulären Umgebungen anpassen, denen sie während eines Infektionszyklus ausgesetzt sind.Allerdings ist dieser Aspekt der Brucella-Biologie nur unzureichend verstanden und die in der intrazellulären Nische verfügbaren Nährstoffe sind unbekannt.Hier untersuchten wir die zentralen Wege des C-Metabolismus, die von Brucella abortus verwendet werden, indem wir die mutmaßliche Fructose-1,6-Bisphosphatase (fbp und glpX), die Phosphoenolpyruvatcarboxykinase (pckA), die Pyruvatphosphatdikinase (ppdK) und das Äpfelsäureenzym (mae) löschten. Gene.In glukoneogenen, aber nicht in reichen Medien war das Wachstum der ΔppdK- und Δmae-Mutanten stark beeinträchtigt und das Wachstum der doppelten Δfbp-ΔglpX-Mutante verringert.In Makrophagen zeigten nur die ΔppdK- und Δmae-Mutanten eine verringerte Vermehrung, und Studien mit der ΔppdK-Mutante bestätigten, dass sie die replikative Nische erreichte.In ähnlicher Weise wurden bei Mäusen nur die ΔppdK- und Δmae-Mutanten abgeschwächt, wobei erstere in Woche 10 beseitigt wurden und letztere länger als 12 Wochen bestehen blieben.Wir haben auch den Glyoxylatzyklus untersucht.Obwohl die Aktivität des aceA-Promotors (Isocitrat-Lyase) in reichhaltigem Medium erhöht war, hatte die Unterbrechung von aceA keine Auswirkung in vitro oder auf die Vermehrung in Makrophagen oder der Milz von Mäusen.Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass B. abortus intrazellulär wächst und dabei einen begrenzten Vorrat an 6-C- (und 5-C-)Zuckern nutzt, der durch Glutamat und möglicherweise andere Aminosäuren kompensiert wird, die in den Krebszyklus eintreten, ohne dass der Glyoxylat-Shunt eine entscheidende Rolle spielt.