ONPG CAS: 369-07-3 98,0 % min. weißes bis cremefarbenes Pulver
| Katalognummer | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Produktname | ONPG (2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranosid) |
| Molekularformel | C12H15NO8 |
| Molekulargewicht | 301.25 |
| Speicherdetails | 2 bis 8 °C |
| Harmonisierter Tarifkodex | 29400000 |
Produktspezifikation
| Reinheit (HPLC) | Mindest.98,0 % |
| Aussehen | Weißes bis cremefarbenes Pulver |
| Lösung(1 % in Wasser) | Klare, farblose bis leicht gelbliche Lösung |
| Wassergehalt(Karl Fischer) | Max.0,5 % |
| Spezifische optische Drehung [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 °C bis -73,0 °C |
Diskussion zum ONPG-Test (β-Galactosidase-Test)
In letzter Zeit wurden häufig Fragen aufgeworfen: 1. Warum kann der ONPG-Test zur Unterscheidung einer verzögerten Laktosegärung eingesetzt werden?2. Warum besagt die nationale Norm, dass für den ONPG-Test 3 % Natriumchlorid-Trisaccharid-Eisen (oder Trisaccharid-Eisen) verwendet werden müssen?3. Warum sollte bei der Durchführung eines OPNG-Tests bei Vibrio parahaemolyticus gemäß der Norm tropfenweise Toluol zugegeben werden?Was ist die Funktion?
Unser Unternehmen hat viele Informationen überprüft, zusammengefasst und unten mit Ihnen geteilt:
Prinzip: Der chinesische Name von ONPG ist o-Nitrobenzol-β-D-galactopyranosid.ONPG kann durch β-Galactosidase zu Galactose und gelbem o-Nitrophenol (ONP) hydrolysiert werden, sodass die Aktivität von β-Galactosidase durch die Farbänderung des Kulturmediums nachgewiesen werden kann.
Laktose ist ein Zucker, den die meisten Mikroorganismen erkennen müssen.Sein Stoffwechsel erfordert zwei Enzyme, eines ist Zellpermease, Laktose gelangt unter der Wirkung von Permease in die Zellen;die andere ist β-Galaktosidase, die Laktose zu Galaktose hydrolysiert.Laktose und Glukose.β-Galactosidase kann auch direkt auf ONPG einwirken und es zu Galactose und gelbem o-Nitrophenol (ONP) hydrolysieren.Dies kann innerhalb von 24 Stunden erfolgen, sogar mit laktoseverzögerten Fermentern.Daher erklärt es die Beobachtungsergebnisse der Entnahme von Kultur 1 vom Schrägagar und deren Inokulation im Vollkreis bei 36 °C für 1–3 Stunden und 24 Stunden.Wenn β-Galactosidase produziert wird, verfärbt es sich innerhalb von 1–3 Stunden gelb, wenn kein solches Enzym vorhanden ist, ändert es seine Farbe innerhalb von 24 Stunden nicht.
Gemäß den beiden oben genannten Enzymen können Mikroorganismen in die folgenden Kategorien eingeteilt werden:
1 laktosefermentierende (18-24 Stunden) Bakterien mit Permease und β-Galaktosidase P + G +;
2 verzögerte Laktosefermenter (die länger als 24 Stunden dauern) ohne Permease, aber mit Galaktosidase: P-G+.
3 Laktosefreie Fermenter, denen sowohl Permease als auch Galaktosidase fehlen: P- G-.
Der ONPG-Test kann verwendet werden, um Laktose-Lag-fermentierende Bakterien (P-G+) von nicht-fermentierenden Laktosebakterien (PG-) zu unterscheiden, wie zum Beispiel:
1 Unterscheiden Sie späte Laktose-Fermenter (P- G+) von Nicht-Laktose-Fermentern (P- G-).
(a) Citrobacter (+) und Salmonella arizonae (+) aus Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) aus Shigella sonnei (-).
Warum wurde der ONPG-Assay mit einer Übernachtkultur von 3 % Natriumchlorid-Eisentrisaccharid (Eisentrisaccharid) durchgeführt?Unser Unternehmen hat viele Informationen herangezogen, es gibt jedoch keine klare Aussage.Lediglich auf der Website der FDA steht: „Zu testende Kulturen auf Dreifachzucker-Eisen-Schrägagar inokulieren und 18 Stunden lang bei 37 °C (oder einer anderen geeigneten Temperatur, falls erforderlich) inkubieren. Nähragar (oder anderer Schrägagar) mit 1,0 % Laktose kann ebenfalls verwendet werden.“bedeutet: Die Testbakterien wurden auf das Trisaccharid-Eisen-Medium geimpft und 18 Stunden lang bei 37 °C kultiviert.Nähragar-Schrägagar (oder ein anderes Medium mit 1 % Laktose) sind ebenfalls akzeptabel.Daher wird gefolgert, dass das Trisaccharid-Eisen-Medium Laktose enthält.Nach dem Wachstum über Nacht haben die Bakterien eine gute aktive β-Galaktosidase produziert.Mithilfe solcher Bakterien kann ONPG schneller durch β-Galactosidase abgebaut werden.Das experimentelle Phänomen wird schneller und besser manifestiert.Darüber hinaus erfolgt die tropfenweise Zugabe von Toluol und ein Wasserbad für 5 Minuten, um die β-Galactosidase vollständig freizusetzen.
