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Tris-Acetat-Salz wird häufig bei der Herstellung von TAE-Puffer (Tris-Acetat-EDTA) verwendet, der als Laufpuffer und in Agarosegelen verwendet wird.Tris-Acetat-EDTA-Puffer wird für die DNA-Agarose-Gelelektrophorese, aber auch für die nicht denaturierende RNA-Agarose-Gelelektrophorese verwendet.Doppelsträngige DNA verläuft in TAE tendenziell schneller als in anderen Puffern und kann bei längerer Elektrophorese erschöpft werden.Eine Pufferzirkulation oder ein Pufferaustausch während einer längeren Elektrophorese kann die geringere Pufferkapazität beheben.Kann in verschiedenen Konzentrationen verwendet werden, um die Mobilität von DNA in Lösung zu untersuchen.Da Borat im TBE-Puffer (Tris-Borat-EDTA-Puffer, 10X-Pulverpackung, sc-296651) ein starker Inhibitor für viele Enzyme ist, wird TAE-Puffer empfohlen, wenn enzymatische Anwendungen für die DNA-Probe in Betracht gezogen werden.Tris-Acetatsalz ist auch ein Puffer mit hoher Empfindlichkeit in ATP-Assays mit Firefly-Luciferase.

Verwendung: TAE-Laufpuffer ist der am häufigsten verwendete Puffer für die DNA-Agarose-Gelelektrophorese und wird auch für die native RNA-Agarose-Gelelektrophorese verwendet.Doppelsträngige DNA bewegt sich in TAE tendenziell schneller als in anderen Puffern, schwimmt aber auch nicht, da bei längerer Elektrophorese Pufferionen abgebaut werden.Pufferzyklen oder Pufferaustausch während längerer Elektrophorese können die geringere Pufferkapazität ausgleichen.2 Verdünnen Sie den konzentrierten TAE-Puffer, um 1 mMTAE-Puffer mit 40 mM Tris-Acetat und 1 mM EDTA, pH 8,3, zu erhalten.1 mMTAE-Puffer kann sowohl in Agarosegelen als auch als Laufpuffer verwendet werden.Für eine maximale Auflösung wird empfohlen, dass die angelegte Spannung weniger als 5 V/cm (Abstand zwischen den Einheitselektroden) beträgt.

Anwendung: Der TAE-Laufpuffer ist der am häufigsten verwendete Puffer für die DNA-Agarose-Gelelektrophorese im Chemicalbook-Gel und wird auch für die nicht denaturierende RNA-Agarose-Gelelektrophorese verwendet.Doppelsträngige DNA bewegt sich in TAE tendenziell schneller als in anderen Puffern, schwimmt aber auch nicht, da bei längerer Elektrophorese Pufferionen abgebaut werden.Pufferzyklen oder Pufferaustausch während längerer Elektrophorese können die geringere Pufferkapazität ausgleichen.Der konzentrierte TAE-Puffer wurde verdünnt, um 1 mMTAE-Puffer mit 40 mM Tris-Acetat und 1 mM EDTA, pH 8,3, zu erhalten.1 mMTAE-Puffer kann sowohl in Agarosegelen als auch als Laufpuffer verwendet werden.Für eine maximale Auflösung wird empfohlen, dass die angelegte Spannung weniger als 5 V/cm (Abstand zwischen den Einheitselektroden) beträgt.

Verwendung: Beim Nachweis von ATP mit Firefly-Luciferase ist dieses Produkt der empfindlichste Puffer;Nachweis der Glutamatbindung.

Ersetzbare Bindung von [3H]l-Glutaminsäure an Nichtrezeptormaterialien.

Die Bindung von [3H]L-Glutaminsäure an Mikrozentrifugenröhrchen und Glas wurde in vier Puffern untersucht.Die Hintergrundbindung an diese Materialien war vernachlässigbar, wurde jedoch durch Zentrifugation oder Absaugen in Tris-HCl- und Tris-Citrat-Puffer erhöht.Diese Bindung war viel geringer, wenn stattdessen HEPES-KOH oder Tris-Acetat-Puffer verwendet wurde.Die Bindung von [3H]L-Glutamat an Mikrozentrifugenröhrchen wurde durch L-, nicht jedoch durch D-Isomere von Glutamat und Aspartat gehemmt.Auch DL-2-Amino-7-phosphonoheptansäure hemmte die Bindung nicht.Andere Verbindungen, die eine geringe bis mäßige Hemmung zeigten, waren: N-Methyl-D-aspartat, Quisqualat, L-Glutaminsäurediethylester, N-Methyl-L-aspartat, Kainat und 2-Amino-4-phosphonobutyrat.Die Bindung wurde durch denaturierte Rattenhirnmembranen gehemmt.Eine proteinabhängige [3H]Glutamat-Bindung wurde mit einem wiederholt eingefrorenen und aufgetauten Membranpräparat erzielt, wenn die Bindung in Tris-Acetat-Puffer erfolgte.Es wird empfohlen, im Glutamat-Bindungstest Tris-Acetat- oder HEPES-KOH-Puffer zu verwenden.Wenn Tris-HCl- oder Tris-Citrat-Puffer verwendet wird, sollten geeignete Kontrollexperimente durchgeführt werden, um die Bindung an Mikrozentrifugenröhrchen oder Glasfaserfilter zu korrigieren.