Ein monoklonaler Antikörper (mAb 8281), der spezifisch für die terminale β-Galaktose (βGal) von Glykosphingolipiden (GSL) und Glykoproteinen ist, wurde aus Mäusen hergestellt, die mit Lipidextrakt aus frischen Zellen der akuten lymphatischen Leukämie (ALL) immunisiert wurden.Immundünnschichtchromatographie (ITLC) und Konkurrenztests mit gereinigten neutralen GSL-Standards, freien Zuckern und synthetischen Neoglykoproteinen zeigten, dass mAb 8281 stark mit LacCer, GalCer und Gal-β-O-(CH3)2S(CH3)2 reagiert. CONH-(Gal-β-O-CETE) verknüpft mit Rinderserumalbumin (BSA).Auch der vorletzte Zucker spielte bei der Bindung eine Rolle.Der Antikörper reagierte nicht mit Kohlenhydraten mit terminalen αGal-Strukturen und nicht verwandten terminalen Einheiten.Indirekte Immunperoxidase-Färbung und Durchflusszytometrie mit mAb 8281 zeigten eine positive Färbung auf zahlreichen Geweben, einschließlich glatter Muskulatur, Magen-Darm-Schleimhaut, Lymphknoten-B-Zellen und Monozyten.Die ITLC-Analyse der GSL-Zusammensetzung frischer B-Zell-Neoplasien mit mAb 8281 bestätigte das Vorhandensein von Lactosylceramid und Galactosylceramid in Neoplasien unterschiedlicher Differenzierungsstadien.Aufgrund seiner Spezifität für terminale βGal-Kohlenhydratreste kann mAb 8281 bei strukturellen und funktionellen Analysen von GSL nützlich sein.
