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Eukaryontische Zellen enthalten ein empfindliches Gleichgewicht winziger Mengen der vier Desoxyribonukleosidtriphosphate (dNTPs), die nur für einige Minuten der DNA-Replikation ausreichen.Sowohl ein Mangel als auch ein Überschuss an einem einzelnen dNTP können zu erhöhten Mutationsraten, fehlerhafter DNA-Reparatur oder einer Erschöpfung der mitochondrialen DNA führen.dNTPs werden normalerweise durch einen enzymatischen Assay quantifiziert, bei dem der Einbau von radioaktivem dATP (oder radioaktivem dTTP im dATP-Assay) in spezifische synthetische Oligonukleotide durch eine DNA-Polymerase proportional zur Konzentration des unbekannten dNTP ist.Wir stellen fest, dass die häufig verwendete Klenow-DNA-Polymerase das unbekannte dNTP durch das entsprechende Ribonukleotid ersetzen kann, was in einigen Fällen zu einer starken Überschätzung der dNTPs führt.Wir beschreiben nun Testbedingungen für jedes dNTP, die den Einbau von Ribonukleotiden vermeiden.Für die dTTP- und dATP-Assays reicht es aus, die Konzentrationen des Klenow-Enzyms und des markierten dATP (oder dTTP) zu minimieren;Für dCTP und dGTP mussten wir das Klenow-Enzym entweder durch die Taq-DNA-Polymerase oder Thermo-Sequenase ersetzen.Wir vermuten, dass in einigen früheren Berichten der Einbau von Ribonukleotiden zu hohe Werte für dGTP und dCTP verursacht haben könnte.