Produkte

γ-Glutamyltranspeptidasen (γ-GTs) spalten die γ-Glutamylamidbindung von Glutathion und übertragen die freigesetzte γ-Glutamylgruppe auf Wasser (Hydrolyse) oder Akzeptoraminosäuren (Transpeptidierung).Diese allgegenwärtigen Enzyme spielen eine Schlüsselrolle bei der Biosynthese und dem Abbau von Glutathion sowie bei der xenobiotischen Entgiftung.Hier berichten wir über die Kristallstruktur von Bacillus licheniformis γ-GT (BlGT) und seinem Komplex mit l-Glu mit einer Auflösung von 3 Å.Röntgenstrukturen bestätigen, dass BlGT zur Superfamilie der N-terminalen nukleophilen Hydrolasen gehört, und zeigen, dass das Protein eine geöffnete Spalte im aktiven Zentrum besitzt, die der für das homologe Enzym aus Bacillus subtilis berichteten ähnelt, sich jedoch von den für menschliches γ-GT beobachteten unterscheidet für γ-GTs von anderen Mikroorganismen.Daten deuten darauf hin, dass die Bindung von l-Glu eine Neuordnung des C-terminalen Schwanzes der großen BlGT-Untereinheit induziert und die Identifizierung eines Clusters von Säureresten ermöglicht, die möglicherweise an der Erkennung eines Metallions beteiligt sind.Die Rolle dieser Reste für die Konformationsstabilität von BlGT wurde durch die Charakterisierung der Autoprozessierung, der enzymatischen Aktivität sowie der chemischen und thermischen Denaturierung von vier neuen Ala-Einzelmutanten untersucht.Die Ergebnisse zeigen, dass der Ersatz von Asp568 durch ein Ala sowohl die Autoprozessierung als auch die strukturelle Stabilität des Proteins beeinflusst.